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  • 杂志名称:临床和实验医学杂志
  • 主管单位:北京市卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:首都医科大学附属北京友谊医院
  • 国际刊号:1671-4695
  • 国内刊号:11-4749/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
临床和实验医学杂志2003年第03期

用脉冲场电泳法分离环状DNA分子的研究

李志祥;谢桂岚

关键词:脉冲场, 脉冲时间, 倒转电场凝胶电泳, 钳位均匀电场电泳, 环状DNA
摘要:目的探讨用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分离大分子环状DNA.方法使用脉冲场凝胶电泳仪器,设定不同电泳条件,以已知分子大小的环状DNA作为标准参照物,对不同环状DNA分子进行分离.结果使用倒转电场凝胶电泳(FIGE)方式,用0.6%或0.5%琼脂糖凝胶,正向电压梯度9 V/cm,脉冲时间2.0 s,反向电压梯度9V/cm,脉冲时间1.0 s,缓冲溶液温度14℃,电泳时间8 h,适宜分离2~33kb环状DNA分子.结论脉冲场凝胶电泳是分离大分子DNA的必须技术.然而,电泳时的条件设定,对是否能有效分离影响很大.为了有效分离大分子DNA,需要摸索实验,建立适设定条件.