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  • 杂志名称:临床和实验医学杂志
  • 主管单位:北京市卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:首都医科大学附属北京友谊医院
  • 国际刊号:1671-4695
  • 国内刊号:11-4749/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
临床和实验医学杂志2010年第07期

昆明种小鼠胚胎干细胞的分离、培养与鉴定

陈明玉

关键词:昆明小鼠, 胚胎干细胞, 分离, 培养, 鉴定
摘要:目的 探讨昆明种小鼠胚胎干细胞的分离、培养和鉴定.方法 收集小鼠14~16 d胚龄的囊胚,以小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的胚胎干细胞(ES)细胞样集落,分离隆起生长的胚胎内细胞团并继续培养,观察集落的生长状态,通过碱性磷酸酶染色进行的分析鉴定,并对其体外分化能力进行检测.结果 共培养收集74个昆明小鼠的囊胚,其中有53个囊胚的内细胞团(ICM)离散程度较强;ES细胞集落的特征呈鸟巢状,其细胞圆小,细胞核大,排列紧密,边缘清晰,细胞之间的界限不清楚;碱性磷酸酶(AKP)染色呈阳性,集落呈红棕色或蓝色,成纤维细胞或分化细胞呈淡黄色或无色;体外悬浮培养时,ES细胞集落能够形成简单拟胚体,且Ebs外向性生长,周围分化的细胞形态成多样性.结论 昆明小鼠是我国应用多的实验小鼠,建立昆明小鼠的ES细胞系有利于其转基因动物的获得,能够为我国的科研工作更好地服务.