期刊简介
本刊贯彻党和国家的卫生工作方针政策，执行理论与实践、普及与提高相结合的方针，反映我国医学临床和科研工作的进展，促进学术交流。
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首页>临床和实验医学杂志
- 杂志名称：临床和实验医学杂志
- 主管单位：北京市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：首都医科大学附属北京友谊医院
- 国际刊号：1671-4695
- 国内刊号：11-4749/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定研究
张丹；翟永贞；冯国和
关键词：丙型肝炎病毒, 病毒核心蛋白质类, 酵母双杂交技术
摘要：目的构建含丙型肝炎病毒（ hepatitis C virus，HCV）核心（ core，C）蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体，为C蛋白与宿主蛋白相互作用机制研究奠定基础。方法聚合酶链反应（ PCR）法扩增HCV 1b基因型C蛋白基因，经EcoR I和Pst I双酶切后插入到诱饵载体pGBKT7中，构建含HCV C蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-Core，经酶切分析及核酸测序分析加以鉴定。醋酸锂法将pGBKT7-Core转化入酵母菌株Y2HGold，蛋白印迹法检测C蛋白的表达，通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母细胞的毒性作用及对报告基因的激活作用。结果重组质粒pGBKT7-Core中的C蛋白基因为576 bp，经核酸测序分析与NCBI中注册的HCV 1b基因型C蛋白基因序列一致；转化酵母菌后检测到C蛋白的表达；HCV C蛋白对酵母菌Y2HGold无毒性，且对报告基因无激活作用。结论含HCV C蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体构建成功，表达稳定。
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