期刊简介
本刊贯彻党和国家的卫生工作方针政策，执行理论与实践、普及与提高相结合的方针，反映我国医学临床和科研工作的进展，促进学术交流。
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首页>临床和实验医学杂志
- 杂志名称：临床和实验医学杂志
- 主管单位：北京市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：首都医科大学附属北京友谊医院
- 国际刊号：1671-4695
- 国内刊号：11-4749/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
c-kit突变型人胃肠间质瘤永生化细胞系的建立与鉴定
刘星；蒋伟忠；官国先；陈致奋；卢辉山；周永建
关键词：c-kit突变型, 胃肠间质瘤细胞, hTERT, 永生化
摘要：目的：通过在c-kit突变型人胃肠间质瘤原代细胞中过表达人端粒酶逆转录酶（ hTERT），建立c-kit突变型人胃肠间质瘤永生化细胞系。方法利用聚合酶链反应（ PCR）技术获得hTERT目的基因片段，测序正确后，体外构建端粒酶亚单位（ hTERT）逆转录病毒表达载体，转染c-kit突变型胃肠间质瘤原代细胞，通过RT-PCR及western bloth技术检测hTERT在原代细胞内的表达变化，选取hTERT表达升高的细胞，利用有限稀释法获得高表达hTERT的单克隆细胞株。结果实验中成功获得hTERT目的基因片段，获得的细胞株与原代细胞相比hTERT表达上调，且体外传代50次后依然保持很好的细胞形态及活力。结论成功获得c-kit突变型人胃肠间质瘤永生化细胞系，为进一步研究c-kit突变对胃肠间质瘤的影响奠定基础。
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