期刊简介
本刊贯彻党和国家的卫生工作方针政策，执行理论与实践、普及与提高相结合的方针，反映我国医学临床和科研工作的进展，促进学术交流。
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首页>临床和实验医学杂志
- 杂志名称：临床和实验医学杂志
- 主管单位：北京市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：首都医科大学附属北京友谊医院
- 国际刊号：1671-4695
- 国内刊号：11-4749/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
微小RNA-30 a诱导人心肌细胞凋亡及其机制研究
卢叶；陈锐；万静；鹿斌
关键词：心力衰竭, 微小RNA Gab1蛋白
摘要：目的：探讨心力衰竭患者循环中微小RNA（miR）-30a的表达水平及诱导人心肌细胞凋亡的可能分子机制。方法采集心力衰竭患者和健康志愿者的血清用于检测miRNAs的表达水平。体外实验，将人心肌细胞分为3组：空白对照组（ MOCK 组）、空质粒组（ NC 组）和转染 miR -30a 模拟物组（ miR -30a 组）。用脂质体2000（ Lipo-fectamine2000，Li2）转染miR-30a模拟物（终浓度为100 nmol/L）。采用实时逆转录聚合酶链反应（ RT-PCR）检测各组的miR-30a的表达水平。用细胞计数-8试剂盒（CCK-8）检测各组细胞增殖。用流式细胞仪和Tunel法检测各组心肌细胞的凋亡并检测各组细胞的 Caspase -3活性。用荧光素酶报告基因检测法检测 miR -30a 和接头蛋白 Gab1（Gab1）的相互作用。用蛋白免疫印记法（WB）检测各组增殖细胞核抗原（PCNA）、Ki67和核转录因子Kappa B（NF-κB）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、以及Gab1、β-肌动蛋白（β-actin）的表达水平。结果心力衰竭患者血清中的miRNA-30a表达水平显著高于健康志愿者（ P ﹤0.05）。逆转录聚合酶链式反应（ RT-PCR）结果显示miR-30a组的人心肌细胞miR-30a的表达显著增高相对于NC组（ P ﹤0.05）。CCK-8结果显示miR-30a组OD值低于MOCK组和NC组（ P ﹤0.05）。流式细胞仪和Tunel结果显示miR-30a过度表达的人心肌细胞凋亡高于MOCK组和NC组（ P ﹤0.05）。Caspase-3活性检测显示miR-30组Caspase-3活性显著高于MOCK组和NC组（ P﹤0.05）。荧光素酶报告基因检测法报告miR-30a与Gab1有互补配对序列。WB结果显示miR-30a组PCNA、ki67、Bcl-2、Gab1表达下降，NF-κB、Bax表达上升（ P ﹤0.05）。结论 miR-30a通过下调Gab1抑制人心肌细胞增殖和诱导人心肌细胞凋亡。
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