首页>临床和实验医学杂志
  • 杂志名称:临床和实验医学杂志
  • 主管单位:北京市卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:首都医科大学附属北京友谊医院
  • 国际刊号:1671-4695
  • 国内刊号:11-4749/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
临床和实验医学杂志2016年第20期

NAC对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞Tau蛋白过度磷酸化影响的研究

曹帆帆;张登海;王莹;彭彬;张雪;徐莉敏

关键词:NAC, Aβ25-35, Tau蛋白, 过度磷酸化
摘要:目的探讨 N -乙酰基半胱氨酸(NAC)对β淀粉样蛋白片段25-35(Aβ25-35)诱导 SH - SY5Y 细胞Tau 蛋白过度磷酸化的影响。方法用凝聚态 Aβ25-35刺激 SH - SY5Y 细胞,建立 Tau 蛋白过度磷酸化的细胞模型。分为空白组、对照组和试验组。空白组为未刺激的细胞,对照组给予20μmol·L -1的 Aβ25-35作用6 h,试验组先给予10 mmol·L -1的 NAC 作用24 h,然后给予20μmol·L -1的 Aβ25-35共同作用6 h。通过蛋白免疫印迹法检测 CDK 5的两个亚基 CDK5和 P35/ P25的蛋白水平,以及 Tau 蛋白在 Thr 212和 Ser396位点的磷酸化水平;采用荧光酶标法检测氧自由基(ROS)。对三组细胞的 CDK5和 P35/ P25的蛋白水平、Thr 212和 Ser396位点的磷酸化水平和 ROS 进行比较。结果三组细胞 ROS 荧光值比较结果显示,空白组 ROS 荧光值为231±19,对照组为359±23,试验组为264±32。空白组低,对照组高,试验组 ROS 荧光值明显高于空白组( P <0.05),但低于对照组( P <0.05)。空白组 Tau 蛋白在T212和 S396磷酸化水平分别为1.03±0.09、1.04±0.05,对照组分别为1.63±0.54、1.72±0.34,试验组分别为1.31±0.09、1.21±0.05,空白组低,对照组高,试验组细胞明显高于空白组( P <0.05),但低于对照组( P <0.05)。空白组 CDK5、P35分别为1.00±0.06、1.00±0.18,对照组分别为0.75±0.14、1.12±0.13,试验组分别为0.19±0.21、0.99±0.09。空白组、对照组与试验组 CDK5、P35相比较无显著差异( P >0.05)。空白组 P25水平为1.10±0.16、对照组为1.69±0.20,试验组为1.19±0.03,空白组低,对照组高,试验组 P25值低于对照组,P25值高于空白组,差异具有统计学意义( P <0.05)。结论 NAC 可以降低 Aβ25-35诱导 SH - SY5Y 细胞 Tau 蛋白磷酸化水平。