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  • 杂志名称:临床和实验医学杂志
  • 主管单位:北京市卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:首都医科大学附属北京友谊医院
  • 国际刊号:1671-4695
  • 国内刊号:11-4749/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
临床和实验医学杂志2016年第06期

MiR-141通过其靶基因ZEB1、SIP1调控EMT途径在结直肠癌细胞系中的研究

尹杰;王婷婷;白志刚;蔡军;张军;郑智;王今;刘钊;张忠涛

关键词:结直肠癌, miR-141, EMT, 靶基因
摘要:目的:通过比较 miR -141、靶基因、上皮-间质转化(EMT)标志物在不同结直肠癌细胞系中的差异性表达及相关性;进一步揭示 MicroRNA -141通过 EMT 途径调控结直肠癌肝转移的机制。方法选取具有间质特征的细胞系 SW620和 RKO。构建含 miR -141的重组 LV3- pGLV - h1- GFP - puro 慢病毒 Lenti - miR -141,用空载慢病毒NC - Lenti 作为对照;稳定转染及后续实验:通过 qRT - PCR 和 Western Blot 检测证实 miR -141的成功转染,并比较 miR-141、靶基因、EMT 标志物在不同结直肠癌细胞系中的差异性表达。结果 miR -141的重组 LV3- pGLV - h1- GFP- puro 慢病毒 Lenti - miR -141、NC - Lenti 对细胞系 SW620和 RKO 的佳感染 MOI 值均为100;PCR 检测证实 Lenti -miR -141病毒的感染使 SW620、RKO 细胞中 miR -141的表达明显增加;免疫组化检测证实 miR -141的过表达有效的抑制了靶基因 ZEB1和 SIP1的表达,同时增加了 E - cadherin 的表达并减少了 vimentin 的表达。结论 SW620和 RKO具有间质特征;miR -141的过表达有效地抑制了靶基因 ZEB1和 SIP1的表达,进而影响了 EMT 途径标志物 E - cadher-in 和 vimentin 的表达;进一步验证了 MicroRNA -141通过 EMT 途径调控结直肠癌肝转移。