期刊简介
本刊贯彻党和国家的卫生工作方针政策，执行理论与实践、普及与提高相结合的方针，反映我国医学临床和科研工作的进展，促进学术交流。
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首页>临床和实验医学杂志
- 杂志名称：临床和实验医学杂志
- 主管单位：北京市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：首都医科大学附属北京友谊医院
- 国际刊号：1671-4695
- 国内刊号：11-4749/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
MALAT-1沉默对口腔鳞癌细胞增殖、凋亡及Caspase-3通路的影响
肖宜；韩旭；张建华；徐晓刚
关键词：口腔鳞状细胞癌, 肺癌转移相关转录本-1, 半胱天冬蛋白酶-3, 细胞增殖, 细胞凋亡
摘要：目的 探究RNA干扰技术(RNAi)沉默肺癌转移相关转录本-1(MALAT-1)基因对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡的影响并探讨其作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MALAT-1在人正常口腔上皮细胞系HIOE和OSCC细胞系SCC25中的表达情况.实验分为四组:空白对照组不转染序列;阴性对照组采用对照序列进行转染;RNAi组采用MALAT-1SiRNA进行转染;inhibitor组在SiRNA转染SCC25细胞前30 min,向培养基中加入Caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO进行预处理(终浓度为40 μmol/L).采用RNAi技术敲低SCC25细胞中MALAT-1表达,采用透射电子显微镜(TEM)观察SCC25细胞超微结构;采用CKK-8法检测细胞增殖情况;采用流式膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)法检测细胞凋亡情况;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(WB)检测Caspase-3 mRNA和蛋白表达情况.结果 与正常细胞比较,MALAT-1在人OSCC细胞系SCC25中表达上调,差异有统计学意义(P <0.05).转染MALAT-1 SiRNA可明显降低SCC25细胞中MALAT-1表达(P <0.05).与阴性对照组和空白对照组比较,RNAi组SCC25细胞增殖抑制率明显升高,细胞凋亡明显增加,差异均有统计学意义(P <0.05);细胞呈现出典型的凋亡特征;细胞中Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平均升高(P <0.05).加入Caspase-3抑制剂预处理,细胞凋亡明显减弱(P <0.05).结论 MALAT-1沉默抑制人OSCC细胞系SCC25细胞增殖,促进凋亡,推测可能通过Caspase-3凋亡通路发挥作用.
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