期刊简介
本刊贯彻党和国家的卫生工作方针政策，执行理论与实践、普及与提高相结合的方针，反映我国医学临床和科研工作的进展，促进学术交流。
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首页>临床和实验医学杂志
- 杂志名称：临床和实验医学杂志
- 主管单位：北京市卫生和计划生育委员会
- 主办单位：首都医科大学附属北京友谊医院
- 国际刊号：1671-4695
- 国内刊号：11-4749/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中)
miRNA-146a-5p对癫痫大鼠海马神经元NF-κB信号转导通路的影响
杜双霞；张晓红；赵合意；王亚男；李娜；马京京
关键词：大鼠, 癫痫, miRNA-146a-5p, 海马神经元, 核因子κB
摘要：目的 观察miRNA-146a-5p(miR-146a-5p)对癫痫大鼠海马神经元核因子 κB(NF-κB)信号转导通路的影响.方法 体外培养新生SD大鼠海马神经元,随后制备癫痫海马神经元模型,随机分为三组,空白对照组(con-trol组):转染时添加等体积opti-MEM培养基;阴性对照组(NC组):转染80 nM浓度NC至癫痫大鼠海马神经元;miR-146a-5p组:转染80 nM浓度miR-146a-5p mimics至癫痫大鼠海马神经元.转染后培养24 h,再用200 ng/ml脂多糖(LPS)诱导6 h,采用免疫荧光双染法鉴定体外培养海马神经元,采用膜片钳技术检测正常大鼠海马神经元和癫痫大鼠海马神经元自发性放电频率,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测未经LPS诱导各组海马神经元miR-146a-5p表达水平及经LPS诱导后各组海马神经元核因子 κB抑制蛋白 α(IκBα)、磷酸化IκBα(pIκBα)、NF-κB P65、IKB激酶-β(IKKβ)mRNA表达水平,采用Western blot法检测经LPS诱导后各组海马神经元IκBα、pIκBα、NF-κB P65、IKKβ蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测经LPS诱导后各组细胞培养液中肿瘤坏死因子 α(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达水平.结果 体外培养7 d的癫痫大鼠海马神经元与正常大鼠海马神经元相比较形态未见明显异常;癫痫大鼠海马神经元自发性放电频率明显较正常大鼠海马神经元明显增加(P<0.05);miR-146a-5p组海马神经元miR-146a-5p表达水平明显高于control组和NC组(P<0.05);经LPS诱导后miR-146a-5p组海马神经元pIκBα、NF-κB P65、IKKβmRNA及蛋白表达水平明显低于control组和NC组(P<0.05),而IκBαmRNA及蛋白表达水平明显高于control组和NC组(P<0.05);经LPS诱导后miR-146a-5p组细胞培养液中TNF-α、IL-1、IL-6、ICAM-1表达水平明显低于control组和NC组(P<0.05).结论 miR-146a-5p可抑制LPS诱导的癫痫大鼠海马神经元NF-κB信号转导通路中pIκBα、NF-κB P65、IKKβmRNA及蛋白表达,促进IκBαmRNA及蛋白表达,减少TNF-α、IL-1、IL-6、ICAM-1等炎症因子的释放.
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